Применение кинетического - хромогенного метода определения бактериальных эндотоксинов (ЛАЛ-тест) в технологии очистки генно-инженерного человеческого инсулина

Аннотация

Бактериальные эндотоксины являются естественной возможной примесью, содержание которой в обязательном порядке контролируется в активных фармацевтических субстанциях (АФС), полученных методами генной инженерии в прокариотических продуцентах. Эта примесь может вызывать токсические и / или аллергические реакции у пациента при использовании инъекционных лекарственных форм. Для обеспечения качества в производстве субстанции важно определять содержание бактериальных эндотоксинов не только в конечном продукте – АФС, но и в контрольных точках технологической цепи производства. Кинетический хромогенный метод (ЛАЛ-тест) был применен для определения количества бактериальных эндотоксинов на каждой стадии очистки генно-инженерного человеческого инсулина. Метод позволяет достаточно быстро и точно проводить постадийный контроль и оптимизировать условия технологических и вспомогательных операций. Метод был также успешно применен для экспресс - определения микробной контаминации растворов белка при проведении длительных производственных стадий, таких как рефолдинг и хроматографическая очистка инсулина. Наличие микробного загрязнения было подтверждено методами классической микробиологии.

Список ссылок

1. ГОСТ Р 52249 – 2004, Правила производства и контроля качества лекарственных средств. 2004.
2. ОФС 42 – 0002 – 00, “Бактериальные эндотоксины”. 2000.
3. Novitsky T.J. // Пирогены немикробного происхождения, Бюллетень ЛАЛ-тест. 2002. Т.2. С.5.
4. Ситников А.Г., Травина Л.А., Багирова В.Л. // Современные подходы к определению пирогенности, М: Мир. 2007.
5. Endosafe Times. 2004. V.2(1). P.35.
6. European Pharmacopeia 4th Edition, Strasbourgh, France, V.4.02. 2002.
7. Фармакопейная статья РФ ФС 42-2620-97. 1997.
8. Баирамашвили Д.И. // Рос.Хим.Ж. 2005. Т.XLIX. С.34-45.