Очистка белка и создание поликлональных антител изофермента креатинкиназы головного мозга

A. Rakhmetov, L. Ostapchenko, H. Z. Chae, S. P. Lee

Аннотация


В настоящее время большой актуальностью является разработка методик по идентификации патологических состояний организма человека, в особенности, развитие невропатологических состояний, таких как болезнь Альцгеймера и Паркинсона. Так как, креатинкиназа головного мозга (КК-ВВ) есть ферментом катализирующий синтез высокоэнергетической молекулы креатинфосфата, а также, идентифицирована как фермент, принимающий участие в развитии невропатологических состояний. Нами были проведены выделение и очистка данного белка креатинкиназы из клеток бактерии E.coli. Мы также, успешно выделили поликлональные антитела кролей, выращенные при подкожном введении рекомбинантного белка КК-ВВ. Продемонстрировано специфическое взаимодействие экстрагированных антител изофермента креатинкиназы с лизатами культур клеток HeLa и NIH-3T3.

Список ссылок
1.    Burklen S., Schlattner U., Homayouni R., Gough K., Rak M., Szeghalmi A., and Wallimann T. / J. Biomed. Biotechnol. 2006. V.2006. P.1-11.
2.    Aksenov M.Y., Aksenova M.V., Butterfield D.A., Geddes J.W., and Markesbery W.R. / Neuroscience.2001. V.103.P. 373-383.
3.    Wu A.H. / Clin Chem. 1989. V.35. No. 1. P. 7-13.
4.    Gruemer H.D., Prior T. / Clin. Chim. Acta. 1987. V.162. No. 1. P. 1-18.
5.    Chang E.J., Ha J., Oerlemans F., Lee Y.J., Lee Y.J., Lee S.W., Ryu H.J., Kim H.J., Choi J.Y., Kim H.M., Shin C.S., Park Y.K., Tanaka S., Weiringa B., Lee Z.H., Kim H.H. / Nature Med. 2008. V.14. No. 9. P.966-972.
6.    Wallimann T., Wyss M., Brdiczka D., Nicolay K., and Eppenberger H.M./ Biochem. J. 1992.V. 281.P. 21-40.
7.    Li X.H., Chen Z., Gao Y.S., Yan Y.B., Zhang F., Meng F.G., Zhou H.M. / Int. J. Biol. Macromol. 2011. V. 48. No.2. P. 239-242.
8.    Wang P.F., McLeish M.J., Kneen M.M., Lee G., and Kenyon G.L. / Biochemistry. 2001. V. 40. P. 11698-11705.
9.    Bong S.M., Moon J.H., Nam K.H., Lee K.S., Chi Y.M., and Hwang K.Y./ FEBS Lett. 2008. V. 582.P. 3959-3965.
10.    Chen L.H., Babbitt P.C., Vesquez J.R., West B.L., Kenyon G.L. / J. Biol. Chem. 1991. V. 266. No.18. P. 12053-12057.
11.    Chen L.H., White C.B., Babbit P.C., McLeish M.J., Kenyon G.L. / J. Biol. Chem. 2000. V. 19. No.1. P. 59-66.
12.    Sunahara Y., Uchida K., Tanaka T., Matsukawa H., Inagaki M., Matuo Y. / Clin. Chem. 2001. V. 47. No. 3. P.471-476.
13.    Rakhmetov A., Lee S. P., Ostapchenko L., Chae H. Z. / Vistnyk of KNU. 2013. V. 2(64). P. 58-61.
14.    Eppenberger H.M., Dawson D.M., Kaplan N.O. / J. Biol. Chem. 1967. V. 242. No.2. P. 204-209.
15.    Friedhoff A.J., Lerner M.H. / Life Sci. 1977. V. 20(5). P. 867-873.
16.    Xu C.J., Klunk W.E., Kanfer J.N., Xiong Q., Miller G., Pottegrew J.W. / J Biol Chem. 1996. V. 271(23). P. 13435-13440.
17.    David S., Shoemaker M., Haley B.E. / Brain Res Mol. 1998. V. 54(2). P. 276-287.
18.    White K.C., Babbitt P.C., Buechter D.D., Kenyon G.L. / J. Protein. Chem. 1992. V. 11. No.5. P 489-494.
19.    Eder M., Schlattner U., Becker A., Wallimann T., Kabsch W., Fritz-Wolf K. / Protein Sci. 1999. V. 8. No.11. P. 2258-2269.
20.    Crowe J., Dobeli H., Gentz R., Hochuli E., Stuber D., Henco K. / Methods Mol. Biol. 1994. V. 31. P. 371-87.


Ключевые слова


brain-type creatine kinase, human, purification, expression.

Полный текст: PDF (English) PDF

Ссылки

  • Ссылки не определены.


** ** ** ** ** **

ISSN: 2073-8099

** ** ** ** ** **

Подписаться на наши издания Вы можете через почтовые каталоги Объединенный каталог «Пресса России» «Урал Пресс», «Ивис»«Прессинформ» и «Профиздат».

 

Наши партнеры:

iIPhEB - Международная выставка и форум по фармацевтике и биотехнологиям, 2–4 апреля 2024

Семинар R&D для R&D, 12–13 апреля 2024