ВЛИЯНИЕ ВРЕМЕНИ ИНДУКЦИИ НА БИОСИНТЕЗ БЕЛКА TBI, КОМПОНЕНТА КАНДИДАТНОЙ ВАКЦИНЫ «КомбиВИЧвак», РЕКОМБИНАНТНЫМ ШТАММОМ E. COLI JM-103/рTBI
Аннотация
Рекомбинантный штамм Escherichia coli JM-103/рTBI является продуцентом белка TBI - компонента кандидатной вакцины против ВИЧ-1/СПИД «КомбиВИЧвак». Показано что рекомбинантный штамм Escherichia coli JM-103/рTBI, хранившийся в банке производственных штаммов в течение трех лет, сохраняет способность продуцировать белок TBI.
Показана возможность использования наряду со средой YT, сред ТВ и LB с глицерином для культивирования штамма-продуцента в условиях опытно-промышленного производства.
Исследовано влияние времени подачи индуктора (налидиксовой кислоты) в процессе культивирования штамма на биосинтез рекомбинантного белка TBI. Установлено, что оптимальное время для внесения налидиксовой кислоты при культивировании на среде YT составляет 1ч от момента посева при значениях оптической плотности культуральной жидкости 0,5 - 0,6 А550. На среде ТВ и LB с глицерином это время составляет 1-1,5 ч после посева и оптической плотности 0,5 - 0,8 А550.
Список ссылок
1. Медицинские иммунологические препараты. Надлежащая практика производства медицинских иммунологических препаратов. СП 3.3.2.1288-03, утв. 17.04.2003г
2. Акулова Н.И., Кашперова Т.А., Гогина Я.С., Лебедев Л.Р., Волосникова Е.А., Масычева В.И. Сухая форма посевного бактериального материала рекомбинантного штамма бактерий Escherichia coli YM-103/рTBI- продуцента белка TBI с их использованием. Патент РФ № 2460782, 2012 г.
3. Ильичев А.А., Карпенко Л.И., Ужаченко Р.В., Лебедев Л.Р., Плясунова О.А., Даниленко Е.Д., Масычева В.И., Бажан С.И. Комбинированная вакцина против ВИЧ-1 на основе полиэпитопного белка и ДНК-вакцины. Дизайн и доклинические исследования //Медицинская иммунология, 2007. Т. 9. № 2-3. С. 141.
4. Карпенко Л.И., Бажан С.И., Лебедев Л.Р.. Некрасова Н.А.. Белавин П.А.. Серегин С.В.. Данилюк Н.К., Ерошкин А.М.. Ильичев А.А./ Рекомбинантная вакцина против вируса иммунодефицита человека 1 типа. Патент РФ № 2317107, 2007.
5. Лебедев Л.Р., Ерошкин А.М., Гилева И.П. Способ получения синтетического белка-кандидата в вакцины против HIV-I. // Биотехнология.-1997.-№7-8.-с.38-45.
6. Akulova N.I., Kashperova T.A., Volosnikova E.A., Lebedev L.R. / Optimization of the Process of Cultivation of Recombinant Escherichia coli TBI Protein Producing Strain//Biochemistry and Biotechnology:Research and Development/Eds. S.D. Varfolomeev, G.E. Zaikov, L.P. Krylova (Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia). - New York: Nova Science Publishers, 2012. P.25-34.
7. Методы общей бактериологии: в 3 т./Под ред.Ф.Герхарда и др.- М.: Мир, 1983.Т.1. С.324-350.
8. Клонирование ДНК. Методы/ Под ред. Д.Гловера.- М.: Мир, 1988. С 144-161.
9. Laemmli U.K. // Nature. – 1970.-Vol. 227.- p.680-685.
Показана возможность использования наряду со средой YT, сред ТВ и LB с глицерином для культивирования штамма-продуцента в условиях опытно-промышленного производства.
Исследовано влияние времени подачи индуктора (налидиксовой кислоты) в процессе культивирования штамма на биосинтез рекомбинантного белка TBI. Установлено, что оптимальное время для внесения налидиксовой кислоты при культивировании на среде YT составляет 1ч от момента посева при значениях оптической плотности культуральной жидкости 0,5 - 0,6 А550. На среде ТВ и LB с глицерином это время составляет 1-1,5 ч после посева и оптической плотности 0,5 - 0,8 А550.
Список ссылок
1. Медицинские иммунологические препараты. Надлежащая практика производства медицинских иммунологических препаратов. СП 3.3.2.1288-03, утв. 17.04.2003г
2. Акулова Н.И., Кашперова Т.А., Гогина Я.С., Лебедев Л.Р., Волосникова Е.А., Масычева В.И. Сухая форма посевного бактериального материала рекомбинантного штамма бактерий Escherichia coli YM-103/рTBI- продуцента белка TBI с их использованием. Патент РФ № 2460782, 2012 г.
3. Ильичев А.А., Карпенко Л.И., Ужаченко Р.В., Лебедев Л.Р., Плясунова О.А., Даниленко Е.Д., Масычева В.И., Бажан С.И. Комбинированная вакцина против ВИЧ-1 на основе полиэпитопного белка и ДНК-вакцины. Дизайн и доклинические исследования //Медицинская иммунология, 2007. Т. 9. № 2-3. С. 141.
4. Карпенко Л.И., Бажан С.И., Лебедев Л.Р.. Некрасова Н.А.. Белавин П.А.. Серегин С.В.. Данилюк Н.К., Ерошкин А.М.. Ильичев А.А./ Рекомбинантная вакцина против вируса иммунодефицита человека 1 типа. Патент РФ № 2317107, 2007.
5. Лебедев Л.Р., Ерошкин А.М., Гилева И.П. Способ получения синтетического белка-кандидата в вакцины против HIV-I. // Биотехнология.-1997.-№7-8.-с.38-45.
6. Akulova N.I., Kashperova T.A., Volosnikova E.A., Lebedev L.R. / Optimization of the Process of Cultivation of Recombinant Escherichia coli TBI Protein Producing Strain//Biochemistry and Biotechnology:Research and Development/Eds. S.D. Varfolomeev, G.E. Zaikov, L.P. Krylova (Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia). - New York: Nova Science Publishers, 2012. P.25-34.
7. Методы общей бактериологии: в 3 т./Под ред.Ф.Герхарда и др.- М.: Мир, 1983.Т.1. С.324-350.
8. Клонирование ДНК. Методы/ Под ред. Д.Гловера.- М.: Мир, 1988. С 144-161.
9. Laemmli U.K. // Nature. – 1970.-Vol. 227.- p.680-685.
Ссылки
- Ссылки не определены.
** ** ** ** ** **
ISSN: 2073-8099
** ** ** ** ** **
Подписаться на наши издания Вы можете через почтовые каталоги Объединенный каталог «Пресса России» «Урал Пресс», «Ивис», «Прессинформ» и «Профиздат».
Наши партнеры:
iIPhEB - Международная выставка и форум по фармацевтике и биотехнологиям, 2–4 апреля 2024