Открытый доступ Открытый доступ  Закрытый доступ Доступ платный или только для подписчиков

ЛИПОСОМАЛЬНАЯ EGFP-ТРАНСФЕКЦИЯ МЕЗЕНХИМНЫХ КЛЕТОК КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Людмила Михайловна Межевикина, Екатерина Валерьевна Корниенко, Галина Петровна Маленко, Владимир Иосифович Лозинский, Глеб Юрьевич Косовский

Аннотация


Для идентификациимезенхимных стромальных клеток костного мозга крупного рогатого скота (МСК КМКРС) в гетерогенных первичных популяциях и при культивировании этих клеток на3-х мерных пористых матрицах — криогелях были созданы генетически модифицированныеклоны, несущие витальную метку — улучшенный зеленый (enchansed green protein) флуоресцирующий белок (EGFP). Показано, что МСК КМ КРС обнаруживаютустойчивость к липосомальной трансфекции с помощью плазмидных векторов pEGFP-N1 и pCIEGFP. Эффективность трансфекции не превышает 15-20%, что значительнониже, чем для первичных кумулюсных клеток (КК) и фетальных фибробластов (ФФ)КРС (60-70 и 50-60% соответственно [Косовский Г.Ю. и др., г. Северодвинск. – 2007].Более того, после трансфекции EGFP-векторами МСК КМ КРС теряют способность к размножению и митотическим делениям in vitro, выходят из клеточного цикла. При этом они остаютсяжизнеспособными клетками фибробластоподобной морфологии с большим числомотростков в течение 1-1.5 месяцев непрерывного культивирования. Послелипосомальной EGFP-трансфекцииразмеры терминально дифференцированных МСК КМ КРС достигают 100-200 мкм, что напорядок больше размеров этих клеток в нормальном состоянии.       Одной из причин повышенной устойчивости первичных МСК КМКРС к проникающему действию трансфицирующего агента липофектамина и EGFP-плазмидных векторов,по-видимому, являются особенности строения их плазматических мембран. Нельзятакже исключить влияние чужеродного белка EGFP на процессы терминальнойдифференцировки стромальных клеток in vitro.

Ссылки


Kosovsky G.Yu. / Metodicheskie rekomendacii po vydeleniju i kultivirovaniju mezenhimnyh stvolovyh kletok iz kostnogo mozga zhivotnyh. Rossijskaya akademiya selskohozjajstvennyh nauk, otdelenie veterinarnoj mediciny, Vserossijskij nauchno-issledovatelskij i tehnologicheskij institut biologicheskoj promyshlennosti . Moskva. 2009. P.20

Kosovsky G.Yu., Kotenko K.V., Byshmanov A.Yu.,Kretov A.S. / I naychno-prakticheskaya konferencija po profpatologii “ Aktualnye voprosy profpatologii ”.Severodvinsk.2007.P. 86-88.

Kosovsky G.Yu.,Kornienko E.V.,Kosovskaja E.V., Glazko V.I. / Integral. 2014. № 1. P. 12-14.

Kosovsky G.Yu.,Potiridi Yu.V., Rikhmaer D.M., Khovankina A.V. , Glazko T.T,. Kosovskaja E.V. / Veterinarija I kormlenie. 2014. № 6. P. 53-56.

Lebedev K.A. / Phiziologija cheloveka. 2010. Т. 36.№ 6.P. 5–13

Lobanok E.S., Kvacheva Z.B, Pinchuk S.V., Volk M.V., Mezhevikina L.M., Fesenko E.E., Volotovsky I.D. / Biophizika .2014. Т. 49. vyp. 2. P. 360-368.

Poleshko A.G., Lobanok E.S., Mezhevikina L.M., Fesenko E.E., Volotovsky I.D./ Biophizika. 2014. Т. 49. vyp. 6. P. 1150-1155.

Sakharova N.Yu., Mezhevikina L.M., Smirnov A.A., Vikhljanceva E.F. / Kletochnye tehnologii v biologii i medicine. 2014. № 1.P. 52-56.

Stepanenko O.V., Verhusha V.V., Kuznecova I.M., Turoverov K.K. / Citilogija. 2007. Т. 49. № 5. P. 395—420.

Bernardo M.E., Fibbe W.E. / Mesenchymal stromal cells and hematopoietic stem cell transplantation. Immunology Letters, 2015, in press: ISSN: 0165-2478.

Bianco P., Riminucci M., Gronthos S., Robey P.G. / Stem Cells. 2001. V. 19. P. 180—192.

DeRevel T., Becard N., Sorg T. et al. / Br. J. Hematol.. 2002. V. 118. P. 875.

Diez-Juan A., Izarra A., Valiente I. Et al. / New and old cell homeostasis concepts in the healthy and diseased adukt heart. Npg. Nature. 2010.V. 7. P. 234.

Drummen, G.P.C. / Fluorescent Probes and Fluorescence (Microscopy) Techniques — Illuminating Biological and Biomedical Research. Molecules, 2012, V. 17, P. 14067-14090.

Friedenstein, A.J., Petrakova, K.V., Kurolesova A.I. et al. / Transplantation. 1968.V 6. P. 230–247.

Jaiswal J.K., Sanford M. Simon / Trends in Cell Biology. 2004. V. 14. No 9. P.497—504.

Kadar K., Kiraly KJ. Physiol. Pharmacol.. 2009. V. 60, Suppl. 7. P. 167-175.

Kim S., Honmou O., Kato K./ Brain Res. 2006. V. 1123.P. 27—33.

Lee K.D., Kuo T.K., Whang-Peng J., Chung Y.F., Lin C.T., Chou S.H., Chen J.R., Chen Y.P., Lee O.K./ Hepatology.2004. V. 40.P. 1275-1284.

Lu W., Zhao X., Rajbhandary M., Xie F., Chai X., Mu J., Meng J., Liu Y., Jiang Y., Aimin M.X./ European Journal of Haematology. 2013. V. 91. No 3.P. 249-261.

Ludin B., Matus A./ GFP illuminates the cytoskeleton. Trends in Cell Biology, 1998. V. 8.No 2. P. 72-77.

Majumdar M., Thiede M., Haynesworth S. et al.,/ J. Hematother. Stem Cell Res. 2009. V. 96.P. 84.

Nicholls S.B., Chu J., AbbruzzeseG., Tremblay K.D., Hady J.A. / J. Biol. Chem., 2011. V. 286. No 28. P. 24977-24986.

Pacioni S., D'Alessandris Q.G., Giannetti S., Morgante L., DePascales I., Cocce V., Bouomi A., Pascucci L.,Alessandri G., Pessina A., Falchetti M.L., Pallini R./ Stem Cell Res. Ther. 2015.V. 6. No 1.P. 194.

Persson F., Barkefors I., Elf J./ Current Opinion in Biotechnology.2013. V. 24, No 4. P. 737—744.

Pevsner-Fisher M., Morad V., Cohen-Sfady M. et al. / Blood. 2007. V. 109. P. 1422.

Schepartz A.; Gonzalez R.L./ Current Opinion in Chemical Biology. 2011. V. 15.P. 749—751.

Tsien R.Y. /. Annual Review of Biochemistry.1998.V.67.No 1. С. 509—544.

Tsien R.Y. / FEBS Letters. 2005. V. 579. No 4. P. 927—932.

Zimmer M. / Chemical Reviews. 2002. V. 102. No 3. P. 759—782.

Zou Z., Zhang Y., Hao L., Wang F., Liu D., Su Y., Sun H. / Expert Opinion on Biological Therapy. 2010.V. 10. No 2.P. 215-230.


Полный текст: PDF

Ссылки

  • Ссылки не определены.


** ** ** ** ** **

ISSN: 2073-8099

** ** ** ** ** **

Подписаться на наши издания Вы можете через почтовые каталоги Объединенный каталог «Пресса России» «Урал Пресс», «Ивис», «Прессинформ» и «Профиздат».

 

Наши партнеры:

iIPhEB - Международная выставка и форум по фармацевтике и биотехнологиям, 2–4 апреля 2024

Семинар R&D для R&D, 12–13 апреля 2024