Открытый доступ Открытый доступ  Закрытый доступ Доступ платный или только для подписчиков

Конструирование химерных полипептидов для переноса генетического материала в клетки млекопитающих

Мария Борисовна Пыхтина, В. П. Романов, С. М. Мирошниченко, А. Б. Беклемишев

Аннотация


Создание эффективной системы переноса генетического материала в ткани и органы человека в терапевтических целях является актуальной задачей генотерапии. Один из подходов к решению этой проблемы основан на использовании в качестве переносчика ДНК невирусных векторов полипептидной природы. В настоящей работе сконструированы рекомбинантные химерные полипептиды, содержащие полноразмерные аминокислотные последовательности: а) гистона Н2А человека, используемого в качестве ДНК-связывающего домена и компонента, обусловливающего внутриклеточное и внутриядерное проникновение ДНК; б) аполипопротеина А-I (апоА-I) человека, обусловливающего связывание комплекса ДНК-химер с липидами и, таким образом, защиту ДНК от нуклеаз; в) пептида PTD-4, являющегося аналогом ДНК-трансдуцирующего домена белка ТАТ ВИЧ и обеспечивающего внутриклеточную интернализацию комплекса. Методом гель-ретардации продемонстрирована способность очищенных полипептидов связывать плазмидную ДНК (pEGFP-N1) с высокой аффинностью. Исследована трансфецирующая активность химерных полипептидов в сравнении с липофектамином в экспериментах по переносу плазмиды pEGFP-N1 в клетки НЕК 293Т. Продемонстрирована возможность использования химеров для переноса генетического материала в ядра клеток млекопитающих.


Ключевые слова


генотерапия, химерные полипептиды, трансфекция, гистон Н2А, апо-АI

Ссылки


Van den Berg A., Dowdy S. F. / Curr. Opin. Biotechnol. 2011. V. 22. No. 6. P. 888 – 893.

Balicki D., Beutler E. / Mol. Med. 1997. V. 3. No. 11. P. 782 – 787.

Puebla I., Esseghir S., Mortlock A., Brown A., Crisanti A. / J. Biotechnol. 2003. V. 105. No. 3. P. 215 – 226.

Wang C., Zhang Y. / Cancer Biother. Radiopharm. 2011. V. 26. No. 1. P. 121 – 126.

Wagstaff K. M., Glover D. J., Tremethick D. J., Jans D. A. / Mol. Ther. 2007. V. 15. No. 4. P. 721 – 731.

Baake M., Doenecke D., Albig W. / J. Cell. Biochem. 2001. V. 81. No. 2. P. 333 – 346.

Balicki D., Putnam C. D., Scaria P. V., Beutler E. / Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2002. V. 99. No. 11. P. 7467 – 7471.

Zaitsev S., Buchwalow I., Haberland A., Tkachuk S., Zaitseva I., Haller H., Bцttger M. / Acta Histochem. 2002.V. 104. No. 1. P. 85 – 92.

Kawabata K., Takakura Y., Hashida M. / Pharm. Res. 1995. V. 12. No. 6. P. 825 – 830.

Mo Z. C., Ren K., Liu X., Tang Z. L., Yi G. H. / Adv. Drug Deliv. Rev. 2016. No. 1. P. 132 – 147.

Pownall H. J., Rosales C., Gillard B. K., Ferrari M. / Methodist Debakey Cardiovasc J. 2016. V. 12. No. 3. P. 146 – 150.

Allen T. M., Hansen C., Martin F., Redemann C., Yau-Young A. / Biochim. Biophys. Acta. 1991.

Hatfield G. W., Roth D. A. / Biotechnol. Ann. Rev. 2007. V. 13. P. 27 – 42.

Ho A., Schwarze S. R., Mermelstein S. J., Waksman G., Dowdy S. F. / Trends. Mol. Med. 2007.

Sato K., Hamada M., Asai K., Mituyama T. CENTROIDFOLD: a web server for RNA secondary structure prediction / Nucl. Acids Res. 2009. 37 (Web Server issue): W277 – 80.

Randall L. L., Hardy S. J. / Cell. 1986. V. 46. P. 921 – 928.

Uchegbu I. F., Vyas S. P. / Int. J. Pharm. 1998. V. 172. Nos. 1 – 2. P. 33 – 70.


Полный текст: PDF

Ссылки

  • Ссылки не определены.


** ** ** ** ** **

ISSN: 2073-8099

** ** ** ** ** **

 

Подписаться на наши издания Вы можете через почтовые каталоги агентства «Роспечать» и Объединенный каталог «Пресса России», а также на сайтах агентств «УП Урал Пресс», «Информнаука», «Прессинформ» и «Профиздат».