Открытый доступ Открытый доступ  Закрытый доступ Доступ платный или только для подписчиков

Разработка метода очистки рекомбинантного эритропоэтина человека, продуцируемого культурой клеток CHOpE

Е. А. Нечаева, И. Ф. Радаева, Н. Б. Думченко

Аннотация


DOI: 10.30906/2073-8099-2020-12-1-37-43

На основе культуры клеток CHOpE получен рекомбинантный эритропоэтин человека. Для выделения и очистки применяли несколько схем, состоящих из последовательных стадий, включающих хроматографию на иммуносорбенте РС/ED7-Sepharose FF, анионообменную хроматографию с использованием сорбента Q-Sepharose FF, гель-фильтрацию на Sephacryl S200 SF. Разработан метод выделения и очистки, который позволяет получить рекомбинантный эритропоэтин человека с высокой степенью чистоты, соответствующий требованиям, предъявляемым к эритропоэтину.


Ключевые слова


изоэлектрофокусирование, подлинность, продуцент эритропоэтина, рекомбинантный эритропоэтин человека, хроматографическая очистка, штамм клеток СHOpE

Ссылки


Oster H. S., Hoffman M., Prutchi-Sagiv S., et al. Erythropoietin in clinical practice: Current use, effect on survival and future directions / Isr. Med. Assoc. J. 2006. V. 8. No. 10. P. 703 – 706.

Danco J., Huch R., Huch A. Epoietin alfa for treatment of postpartum anaemia / Lancet. 1990. V. 335. P. 737 – 738.

Melli G., Jack C., Lambrinos G. L., et al. Erythropoietin protects sensory axons against paclitaxel-induced distal degeneration / Neurobiol. Dis. 2006. V. 24. No. 3. P. 525 – 530.

Шукуров Р. Р., Лобанова Н. В., Савинова И. Н. и др. Создание стабильной клеточной линии-продуцента рекомбинантного дарбэпо-этина-альфа на основе клеток СНО / Биотехнология. 2013. № 2. С. 46 – 54. (Shukurov R. R., Lobanova N. V., Savinova I. N., et al. Design of cell line producing recombinant darbepoethin alpha based on CHO cells / Biotechnology. 2013. No. 2. P. 46 – 54).

Зеленин М. Г., Крамерова И. А., Колобков С. Л. и др. Штамм СНО культивируемых клеток китайского хомячка — продуцент эритропоэтина человека. Патент РФ, 2089611, С 12 № 5/16. 1997. (Zelenin M. G., Kramerova I. A., Kolobkov S. L., et al. The strain SNO cultivated cells of Chinese hamster — producing human erythropoietin. Patent of the Russian Federation, 2089611, C 12 N5/16. 1997).

Беляков Н. В., Дурманов Н. Д., Калинин Ю. Т. и др. Способ получения рекомбинантного человеческого эритропоэтина, СНО-ЭПО / 8РМ штамм культивируемых клеток яичника китайского хомячка продуцент эритропоэтина. Патент РФ 2125093, С 12 Ш 5/16.1999. (A method of producing recombinant human erythropoietin, CHO-EPO/8PM strain of cultured Chinese hamster ovary cells producing erythropoietin. Patent of the Russian Federation 2125093, С 12 Ш 5/16.1999).

Киприянов С. М., Царева А. А., Офицеров В. И. и др. Рекомбинантная плазмидная ДНК psv-¬dep-poly-Neo, кодирующая эритропоэтин человека, штамм культивируемых клеток яичника китайского хомячка CHOpE — продуцент эритропоэтина человека. Патент РФ 2070931, C 12 N15/12. 1996. (Kipriyanov S. M., Tsareva A. A., Ofitserov V. I., et al. Recombinant plasmid psv-dep-poly-Neo DNA encoding human erythropoietin, a strain of cultured Chinese hamster ovary cells, CHOpE, a human erythropoietin producer. Patent of the Russian Federation 2070931, C 12 N15/12. 1996).

Курбанова Е. К., Чулкова Т. Ю., Бырихина Д. В. и др. Фарма-2020. Технологические аспекты производства некоторых ЖНВЛП / Биофарм. журн. 2012. Т. 4. № 3. С. 21 – 45. (Kurbanova E. K., Chulkova T. Yu., Byrikhin D. V., et al. Pharma 2020. Technological aspects of the production of some VED / Biopharm. J. 2012. V. 4. No. 3. P. 21 – 45).

Беляков Н. В., Коробицын Л. П., Пивоваров А. М. и др. Способ очистки рекомбинантного эритропоэтина человека. Патент РФ 2145610, С 12 И5/06. 2000. (Belyakov N. V., Korobitsyn L. P., Pivovarov A. M., et al. Method for the purification of recombinant human erythropoietin. Patent of the Russian Federation 2145610, C 12 I5/06. 2000).

Фритч Э., Хьювик Р.-М., Джокобс К. Способ получения эритропоэтина человека. Патент РФ 2129613, C 12 P21/02. 1999. (Fritsch E., Huyvik R.-M., Jokobs K. A method for producing human erythropoietin. Patent of the Russian Federation 2129613, C 12 P21 / 02. 1999).

Гусаров Д. А. Разработка научных основ создания технологии выделения и очистки генно-инженерных белков Дис. ... д-ра хим. наук. — М.: Московская гос. акад. тонкой хим. технол., 2014. (Gusarov D. A. Development of scientific bases of creation of technology for isolation and purification of genetically engineered proteins: dissertation ... Dr. Chemical. Sciences: Mosc. state Academy of Fine Chemical Technology, Moscow, 2014).

Вододохов В. Г., Шингель А. М., Бабарико Д. В. и др. Разработка метода выделения генно-инженерного эритропоэтина человека из лекарственных препаратов / 17-я Междунар. науч. конф. «Сахаровские чтения 2017 г: экологические проблемы XXI века». — Минск, 2017. С. 126 – 127. (Vododokhov V. G., Shingel A. M., Babariko D. V., et al. Development of a method for isolating human genetic erythropoietin from drugs / 17th Int. Sci. Conf. «Sakharov Readings 2017: Environmental Problems of the 21st Century». — Minsk, 2017. P. 126 – 127).

Синева С. А., Чернобурова Н. А., Пивоваров А. М. и др. Моноклональные антитела к человеческому рекомбинантному эритропоэтину: получение, характеристика, использование / Биотехнология. 2000. № 1. С. 3 – 13. (Sineva S. A., Chernoburov N. A., Pivovarov A. M., et al. Monoclonal antibodies to human recombinant erythropoietin: production, characterization, use / Biotechnology. 2000. No. 1. P. 3 – 13).

Радаева И. Ф., Нечаева Е. А., Дроздов И. Г. Колекция культур клеток ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора. — Новосибирск: Цэрис, 2009. — 251 с. (Radaeva I. F., Nechaeva E. A., Drozdov I. G. Collection of cell cultures FBUN SSC VB «Vector» Rospotrebnadzor. — Novosibirsk: Ceris, 2009. — 251 p).

Радаева И. Ф., Колесова М. Е., Сереброва В. С. и др. Разработка технологии получения лиофилизованной субстанции рекомбинантного эритропоэтина человека / Биотехнология. 2013. № 2. С. 67 – 73. (Radaeva I. F., Kolesova M. E., Serebrova V. S., et al. Development of technology for production of lyophilized substance of human recombinant erythropoietin / Biotechnology. 2013. No. 2. P. 67 – 73).

Европейская фармакопея 7,0. 12/2011. Т. 2. С. 4360 – 4363. (European Pharmacopoeia 7.0. 12/2011. P. 4360 – 4363).

ОФС. 1.2.3.0012.15 Определение белка / ГФ 13. Ч. 1. — М.: МЗРФ, 2015. С. 757 – 772. (General pharmacopoeial article OFS. 1.2.3.0012.15 «Determination of protein». State Pharmacopoeia 13. Part 1. — M.: MZRF, 2015. P. 757 – 772).

ОФС. 1.2.1.1.0003.15 Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях / ГФ 13. Ч. 1. — М.: МЗРФ, 2015. С. 370 – 379. (General pharmacopoeial article OFS. 1.2.1.1.0003.15 «Spectrophotometry in the ultraviolet and visible regions» State Pharmacopoeia 13. Part 1. — Moscow: MZRF. 2015. P. 370 – 379).


Полный текст: PDF

Ссылки

  • Ссылки не определены.


** ** ** ** ** **

ISSN: 2073-8099

** ** ** ** ** **

Подписаться на наши издания Вы можете через почтовые каталоги Объединенный каталог «Пресса России» «Урал Пресс», «Ивис», «Прессинформ» и «Профиздат».

 

Наши партнеры:

iIPhEB - Международная выставка и форум по фармацевтике и биотехнологиям, 2–4 апреля 2024

Семинар R&D для R&D, 12–13 апреля 2024