ПЕПТИДИЛ-ПРОЛИЛ-ИЗОМЕРАЗА SLyD УПРАВЛЯЕТ УКЛАДКОЙ РЕКОМБИНАНТНОГО ФРАГМЕНТА ДЛИННЫХ ХВОСТОВЫХ ФИБРИЛЛ БАКТЕРИОФАГА Т4.

R. N. Chuprov-Netochin, S. A. Amarantov, M. M. Shneider, N. N. Sykilinda, M. V. Filchikov, M. A. Ivanova, V. V. Mesyanzhinov, K. A. Miroshnikov

Аннотация


Ключевая стадия заражения клетки Escherichia coli бактериофагом Т4 – связывание с поверхностью клетки-хозяина. В случае бактериофага Т4, этот процесс определяется специфичностью белков длинных хвостовых фибрилл фага, в частности gp37. В природных условиях сборка и олигомеризация этого белка требует участия по крайней мере двух дополнительных белковых факторов – gp57A и gp38, что сильно затрудняет получение рекомбинантной формы gp37. Для преодоления этого препятствия была применена одна из современных белково-инженерных стратегий – создание химерного белка, имеющего в своем составе “белок-носитель”, направляющий правильную сборку целевого белка. Присоединение к дилетированному фрагменту пептидил-пролил-изомеразы SLyD E.coli С-концевого фрагмента gp37 позволило получить рекомбинантный вариант белка в растворимой форме. Методом малоуглового рассеивания рентгеновских лучей было показано, что полученный химерный белок формирует тример с нативной конформацией, который проявляет биологическую активность.

Список ссылок
1.    Hashemolhosseini S., Montag D., Krämer L., Henning U. / Journal of Molecular Biology. 1994. V. 241. Pp. 524-533.
2.    Cerritelli M.E., Wall J.S., Simon M.N., Conway J.F., Steven A.C. / J. Mol. Biol. 1996. V. 260. Pp. 767-780.
3.    Tétart F., Repoila F., Monod C., Krisch H.M. / Journal of Molecular Biology. 1996. V. 258. Pp. 726-731.
4.    Qu Y., Hyman P., Harrah T., Goldberg E. / J Bacteriol. 2004. V. 186. Pp. 8363-8369.
5.    Симакова М.Н., Симаков Н.Н. / Молекулярная биология. 2005. V. 39. Pp. 321-329.
6.    Курочкина Л.П., Марусич Е.И. / Биохимия. 1998. V. 4. Pp. 473-482.
7.    Matsui T., Griniuviene B., Goldberg E., Tsugita A., Tanaka N., Arisaka F. / J.Bacteriol. 1997. V. 179. Pp. 1846-1851.
8.    Galan Bartual S., Garcia-Doval C., Alonso J., Schoehn G., Van Raaij M.J. / Protein Expression and Purification. 2010. V. 70. Pp. 116-121.
9.    Sorensen H.P., Mortensen K.K. / J Biotechnol. 2005. V. 115. Pp. 113-128.
10.    Davis G.D., Elisee C., Newham D.M., Harrison R.G. / Biotechnol Bioeng. 1999. V. 65. Pp. 382-388.
11.    Sambrook R., Russel D.W. // Cold Spring Harbor, N.Y., Cold Spring Harbor Lab. Press. 2001.
12.    Scholz C., Eckert B., Hagn F., Schaarschmidt P., Balbach J., Schmid F.X. / Biochemistry. 2006. V. 45. Pp. 20-33.
13.    Laemmli U.K. / Nature. 1970. V. 227. Pp. 680 – 685.
14.    Schuck P. / Biophys J. 2000. V. 78. Pp. 1606-1619.
15.    Provencher S.W., Glockner J. / Biochemistry. 1981. V. 20. Pp. 33-37.
16.    Svergun D.I., Volkov V.V., Kozin M.B., Stuhrmann H.B. / Acta Crystallogr. 1996. V. 52. Pp. 419-426.
17.    Svergun D.I. / Biophys J. 1999. V. 76. Pp. 2879-2886.
18.    Petoukhov M., Svergun D. / J. Appl. Cyst. 1995. V. 28. Pp. 768 - 773.
19.    Wriggers W. / Biophys Rev. 2010. V. 2. Pp. 21-27.
20.    Van Raaij M.J., Schoehn G., Jaquinod M., Ashman K., Burda M.R., Miller S. / Biol Chem. 2001. V. 382. Pp. 1049-1055.
21.    Мирошников К.А., Сернова Н.В., Шнейдер М.М., Месянжинов В.В. / Биохимия. 2000. V. 65. Pp. 1600-1606.
22.    Чупров-Неточин Р.Н., Файзуллина Н.М., Сыкилинда Н.Н., Симакова М.Н., Месянжинов В.В., Мирошников К.А. / Биоорганическая Химия. 2010. V. 36. Pp. 1-7.
23.    Hottenrott S., Schumann T., Pluckthun A., Fischer G., Rahfeld J.U. / J Biol Chem. 1997. V. 272. Pp. 15697-15701.
24.    Han K.Y., Song J.A., Ahn K.Y., Park J.S., Seo H.S., Lee J. / Protein Eng Des Sel. 2007. V. 20. Pp. 543-549.
25.    Scholz C., Schaarschmidt P., Engel A.M., Andres H., Schmitt U., Faatz E., Balbach J., Schmid F.X. / Journal of Molecular Biology. 2005. V. 345. Pp. 1229-1241.
26.    Weininger U., Haupt C., Schweimer K., Graubner W., Kovermann M., Brüser T., Scholz C., Schaarschmidt P., Zoldak G., Schmid F.X., Balbach J. / Journal of Molecular Biology. 2009. V. 387. Pp. 295-305.



Ключевые слова


Array

Полный текст: PDF (English) PDF

Ссылки

  • Ссылки не определены.


** ** ** ** ** **

ISSN: 2073-8099

** ** ** ** ** **

 

Подписаться на наши издания Вы можете через каталоги «Газеты. Журналы», сайт http://press.rosp.ru/ Агентства «Роспечать», а также в киосках «Роспечать» в Брянске, Владимире, Краснодаре, Рязани и Иркутске.