Представлено экспериментальное обоснование возможности применения методов in vitro для контроля специфической активности холерного токсина (ХТ) и холерогена-анатоксина (ХА) на этапах производства холерной химической вакцины. В работе использовали штамм Vibrio cholerae cholerae 569В серовара Инаба. Экспериментально обоснована возможность использования перевиваемой клеточной линии СНО-К1 для оценки активности ХТ и определения антигенной активности специфической фракции ХА при производстве. Выявлена альтернативность применения дот-иммуноанализа с использованием конъюгата на основе стафилококкового белка А, меченного коллоидным золотом (ДИА ЗНЧ), для оценки активности антигенов в компонентах и готовой лекарственной форме вакцины существующими методами (РДП, РНГА). Установлены критерии применимости методов: содержание ХТ в реакторной культуре по РПИГ, GM₁ ELISA, ДИА ЗНЧ — не менее 1:8 для каждого метода; на модели линии клеток CHO-K1 – 1:80. Впервые разработаны нормативные показатели качества промежуточного продукта производства (специфической фракции ХА) по специфическому воздействию на клетки линии СНО-К1 в реакции анатоксиносвязывания — не менее 2000 ЕС/мг фракции. Разработан алгоритм применения методов in vitro (ПЦР, РПИГ, ДИА ЗНЧ, GM₁ ELISA), позволяющий на этапах производства вакцины определить иммунохимическую и биологическую активность ХТ и ХА.

DOI: 10.30906/2073-8099-2023-15-6-10-16

Приказ МЗ РФ от 06.12.2021 г. № 1122н об утверждении национального календаря профилактических прививок, календаря профилактических прививок по эпидемическим показаниям и порядка проведения профилактических прививок. https://docs.cntd.ru/document/727605537? marker=6520IM (дата обращения 09.10.2023 г.).

Бургасов П. Н., Сумароков А. А., Джапаридзе М. Н. и др. / Пробл. особо опас. инфекций. 1979. Т. 5. № 69. С. 5 – 9.

Джапаридзе М. Н., Караева Л. Т., Сумароков А. А. и др. / Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1981. № 11. С. 75 – 81.

Джапаридзе М. Н., Никитина Г. П., Иванов Н. Р. и др. / Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1982. № 11. С. 29 – 33.

Способ получения пероральной химической вакцины / М. Н. Джапаридзе, А. В. Наумов, М. В. Мелещенко и др. / Патент № 2076734 РФ, МПК А61К 39/00, А61К 35/76; 1993.

Онищенко Г. Г., Попова А. Ю., Кутырев В. В. и др. / Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 2016. № 1. С. 89 – 101.

Онищенко Г. Г., Кутырев В. В., Щуковская Т. Н. и др. / Пробл. особо опас. инфекций. 2011. Вып. 107. № 1. С. 5 – 12.

Воробьева С. А., Дуракова О. С., Громова О. В., Волох О. А., Клокова О. Д., Никифоров А. К. / Пробл. особо опас. инфекций. 2022. № 2. С. 12 – 19.

Щуковская Т. Н., Саяпина Л. В., Кутырев В. В. / Эпидемиол. и вакцинопроф. 2009. № 2. С. 62 – 67.

World Health Organization. Cholera. Weekly Epidemiological Record. V. 93. № 38. — Geneva: WHO, 2017 P. 489 – 496.

Akkermans A., Chapsal J.-M., Coccia E. M., et al. / Biologicals. 2020. № 68. P. 92–107.

Viviani L., Halder M., Gruber M., et al. / Biologicals. 2020. № 63. P. 101 – 105.

Гаева А. В., Громова О. В., Дуракова О. С., Генералов С. В., Волох О. А. / Разраб. и рег. лек. средств. 2018. № 1 (22). С. 30 – 35.

Svennerholm A. M., Wiklund G. / J. Clin. Microbiol. 1983. V. 17. № 4. P. 596 – 600.

Дуракова О. С., Громова О. В., Киреев М. Н., Воробьева С. А., Клокова О. Д., Ливанова Л. Ф., Белякова Н. И., Волох О. А. / Вестн. биотехнол. и физ.-хим. биол. 2018. Т. 14. № 4. С. 10 – 13.

Гаева А. В., Громова О. В., Дуракова О. С., Генералов С. В., Ливанова Л. Ф., Волох О. А. / Биотехнология. 2020. Т. 36. № 3. С. 82 – 89.

Гланц С. Медико-биологическая статистика / Пер. с англ. Ю. А. Данилова, под ред. Н. Е. Бузикашвили, Д. В. Самойлова. — М.: Практика, 1998. — 459 с.

Кобзарь А. И. Прикладная математическая статистика. Для инженеров и научных работников. — М.: Физматлит, 2006. — 816 с.

Лакин Г. Ф. Биометрия. — М.: Высшая школа, 1990. — 352 с.