Открытый доступ Открытый доступ  Закрытый доступ Доступ платный или только для подписчиков

Разработка методики определения карбоксипептидазы методом капиллярного электрофореза

А. А. Киселева, Т. С. Герасимова, Д. А. Гусаров, И. А. Луценко

Аннотация


Фермент карбоксипептидазу (класс гидролаз) активно применяют в фармацевтической промышленности при производстве биотехнологических лекарственных препаратов, в том числе при производстве инсулина и его аналогов в ООО «ГЕРОФАРМ». Определение активности фермента является важной задачей контроля качества на предприятии, так как именно от нее зависит то, какое его количество потребуется на производственный процесс. В связи с тем, что существующие методики определения активности энзима имеют ряд существенных недостатков, разработана более легкая, наглядная и менее трудозатратная методика определения активности карбоксипептидазы при помощи капиллярного электрофореза. На этапе разработки методики для подбора фонового электролита использовали несколько экспериментальных буферных растворов различного состава, из которых оптимальным оказался фосфатный буферный раствор состава 40 мМ Na2HPO4, pH 7,1. Также подобраны параметры метода: ввод пробы при 30 мбар — 5 с; напряжение — 15 кВ; детектирование при 280 нм; общее время анализа — 10 мин. Подтверждена линейность методики и проведена ее апробация на образцах карбоксипептидазы производства ООО «ГЕРОФАРМ».

DOI: 10.30906/2073-8099-2025-17-1-25-30



Ключевые слова


активность, ферменты, карбоксипептидаза, капиллярный электрофорез, методика анализа

Ссылки


Варфоломеев С. Д. Химическая энзимология. — М.: ИЦ «Академия», 2005. — 480 с.

Государственная фармакопея РФ. XIV изд. Т. 1. — М., 2018. https://femb.ru/record/pharmacopea14.

Алексеева Г. М., Никитина Т. Г., Генералова Ю. Э., Михайлова Н. В., Екимова А. А., Апраксин В. Ф., Комарова Н. В. Применение капиллярного электрофореза в анализе лекарственных средств. — СПб.: Кнорус, 2019. — 176 с.

Комарова Н. В., Каменцев Я. С. Практическое руководство по использованию систем капиллярного электрофореза «Капель». — СПб.: ООО «Веда», 2006. — 212 с.

Энгельгард Х. Руководство по капиллярному электрофорезу. — М., 1996. — 111 с.

Glatz Z. / J. Chromatogr. B Analyt. Biomed. Life Sci. 2006. V. 841. No. 1 – 2. P. 23 – 37.

Vinther A., Adelhorst K., Kirk O. / Electrophoresis. 1993. V. 14. No. 5 – 6. P. 486 – 491.

Perron M. J., Page M. / J. Chromatogr. A. 1994. V. 662. No. 2. P. 383 – 388.


Полный текст: PDF

Ссылки

  • Ссылки не определены.


** ** ** ** ** **

ISSN: 2073-8099

** ** ** ** ** **

Подписаться на наши издания Вы можете через почтовые каталоги Объединенный каталог «Пресса России» «Урал Пресс», «Ивис», «Прессинформ» и «Профиздат».

 

Наши партнеры:

iIPhEB - Международная выставка и форум по фармацевтике и биотехнологиям, 2–4 апреля 2024

Семинар R&D для R&D, 12–13 апреля 2024