Контроль качества яда змей рода Agkistrodon на входном этапе технологического процесса

Ie. N. Krasnobryzha, V. L. Karbovskyi, S. P. Gavriliuk, Bolor Buyanbadrakh, Sumya Byambasuren, Punsaldulam Dashnyam, B. Zhugder, Narantuya Nandintsetseg, E. S. Gavryliuk, Tseren Bukha Purev, G. L. Volkov, Ayur Nemekh

Аннотация


В яде змей рода Agkistrodon содержится большое количество белков-индукторов отдельных компонентов системы гемостаза. Их содержание и биологическая активность значительно варьирует в зависимости от вида змей. Среди упомянутых белков такие ферменты, как тромбиноподобные ферменты, активаторы факторов свертывания и фибринолиза, прямые или опосредованные активаторы и ингибиторы агрегации тромбоцитов и т.д. Принципиальным вопросом является точный входящий контроль содержания активных компонентов яда при производстве фармакологических препаратов на основе таких белков, когда анализ цельного яда затруднен разнонаправленным действием белков-индукторов, что делает принципиально невозможным получение информации о содержании и активности отдельных его компонентов без определенных разделительных манипуляций. Эти манипуляции должны дать возможность оттестировать партию сырья на активность и содержание всех компонентов яда, которые предполагается в дальнейшем получать в чистом виде. Ошибка при входящем контроле, может повлечь за собой увеличение себестоимости получаемых препаратов или даже неоправданное использование яда для производства препаратов на основе белков-индукторов.
На основе яда из трех видов змей рода Agkistrodon – A. halys halys, A. blomhoffi ussuriensis и A. acutus – был разработан комплекс методов входящего анализа на предмет содержания активных компонентов, влияющих на систему гемостаза. Данный комплекс включает использование методов хроматографического, электрофоретического фракционирования и методов, основанных на применении специфических хромо/флюорогенных субстратов, позволяющих анализировать активность специфических компонентов системы гемостаза. Такой подход позволил сравнить активность и содержание ряда белков-индукторов: тромбиноподобных ферментов, активаторов плазминогена и протеина С, фибрино(гено)литического фермента, ингибитора агрегации тромбоцитов, фосфолипазы А2. Применение разработанного комплекса методов входящего контроля сырья показало возможность количественной оценки активных компонентов змеиного яда до его фракционирования, что в свою очередь позволило избежать использования яда, характеристики которого не удовлетворяют как экономическим, так и фармакологическим требования для успешного производства фармацевтических препаратов на основе белков-индукторов системы гемостаза.

Список ссылок

1.    http:/www.gmpua.com/Biotechnology/USA/InternationalBiotechnologyGMP/InternationalBiotechnologyGMP.PDF Anisfeld M.H. / International Biotechnology, Bulk Chemical, and Pharmaceutical GMPs. Fifth ed. --- USA, Englewood: Interpharm Press, год?. P. 757.
2.    Mandenius C., Graumann K., Schultz T.W., Premstaller A., Olsson I. / Biotechnol. J. 2009. V.4. P. 600-609.
3.    Rathore A.S. / Cell Press. 2009. Статья в печати.
4.    http:/www.farosplus.ru/index.htm?/bad/bad_36/bad_36.htm
5.    Matsui T,, Fujimura Y., Titani K. /  Biochem. Biophys. Acta. 2000. V. 1477. P. 146-156.
6.    Daltry J.C., Wuster W., Thorpe R.S. /  Nature. 1996. V.379. P.537-540.
7.    Markland F. S. /  Toxicon. 1997. V.36. P.1749-1800.
8.    Варецкая Т.В. / Укр. биохим. журн. 1960. Т.32. C. 13-24.
9.    Bradford M. / Anal. Biochem. 1976. V.72. P. 248-254.
10.     Seligson D. / CRC Handbook Series in Clinical Laboratory Science. Section I Hematology. 1980. V.III. P. 301.
11.     Меньшиков В.В. / Лабораторные методы исследования в клинике. --- М.: 1987. --- 310 с.
12.     Li Z., Agelon L.B., Vance D.E. / J.Biol. Chem. 2005. V.280(45). P.37798-37802.
13.    http:/www.diapharma.com/products/hemostasis/chromogenic_substrates/activated_protein_c_apc/s821090_821090
14.    http:/www.diapharma.com/products/hemostasis/chromogenic_substrates/thrombin/s820324_820324


Ключевые слова


контроль качества, хроматография, электрофорез, яд змей, эффекторы системы гемостаза

Полный текст: PDF (English) PDF

Ссылки

  • Ссылки не определены.


** ** ** ** ** **

ISSN: 2073-8099

** ** ** ** ** **

 

Подписаться на наши издания Вы можете через каталоги «Газеты. Журналы», сайт http://press.rosp.ru/ Агентства «Роспечать», а также в киосках «Роспечать» в Брянске, Владимире, Краснодаре, Рязани и Иркутске.