В яде змей рода Agkistrodon содержится большое количество белков-индукторов отдельных компонентов системы гемостаза. Их содержание и биологическая активность значительно варьирует в зависимости от вида змей. Среди упомянутых белков такие ферменты, как тромбиноподобные ферменты, активаторы факторов свертывания и фибринолиза, прямые или опосредованные активаторы и ингибиторы агрегации тромбоцитов и т.д. Принципиальным вопросом является точный входящий контроль содержания активных компонентов яда при производстве фармакологических препаратов на основе таких белков, когда анализ цельного яда затруднен разнонаправленным действием белков-индукторов, что делает принципиально невозможным получение информации о содержании и активности отдельных его компонентов без определенных разделительных манипуляций. Эти манипуляции должны дать возможность оттестировать партию сырья на активность и содержание всех компонентов яда, которые предполагается в дальнейшем получать в чистом виде. Ошибка при входящем контроле, может повлечь за собой увеличение себестоимости получаемых препаратов или даже неоправданное использование яда для производства препаратов на основе белков-индукторов.
На основе яда из трех видов змей рода Agkistrodon – A. halys halys, A. blomhoffi ussuriensis и A. acutus – был разработан комплекс методов входящего анализа на предмет содержания активных компонентов, влияющих на систему гемостаза. Данный комплекс включает использование методов хроматографического, электрофоретического фракционирования и методов, основанных на применении специфических хромо/флюорогенных субстратов, позволяющих анализировать активность специфических компонентов системы гемостаза. Такой подход позволил сравнить активность и содержание ряда белков-индукторов: тромбиноподобных ферментов, активаторов плазминогена и протеина С, фибрино(гено)литического фермента, ингибитора агрегации тромбоцитов, фосфолипазы А2. Применение разработанного комплекса методов входящего контроля сырья показало возможность количественной оценки активных компонентов змеиного яда до его фракционирования, что в свою очередь позволило избежать использования яда, характеристики которого не удовлетворяют как экономическим, так и фармакологическим требования для успешного производства фармацевтических препаратов на основе белков-индукторов системы гемостаза.

Список ссылок

1.    http:/www.gmpua.com/Biotechnology/USA/InternationalBiotechnologyGMP/InternationalBiotechnologyGMP.PDF Anisfeld M.H. / International Biotechnology, Bulk Chemical, and Pharmaceutical GMPs. Fifth ed. --- USA, Englewood: Interpharm Press, год?. P. 757.
2.    Mandenius C., Graumann K., Schultz T.W., Premstaller A., Olsson I. / Biotechnol. J. 2009. V.4. P. 600-609.
3.    Rathore A.S. / Cell Press. 2009. Статья в печати.
4.    http:/www.farosplus.ru/index.htm?/bad/bad_36/bad_36.htm
5.    Matsui T,, Fujimura Y., Titani K. /  Biochem. Biophys. Acta. 2000. V. 1477. P. 146-156.
6.    Daltry J.C., Wuster W., Thorpe R.S. /  Nature. 1996. V.379. P.537-540.
7.    Markland F. S. /  Toxicon. 1997. V.36. P.1749-1800.
8.    Варецкая Т.В. / Укр. биохим. журн. 1960. Т.32. C. 13-24.
9.    Bradford M. / Anal. Biochem. 1976. V.72. P. 248-254.
10.     Seligson D. / CRC Handbook Series in Clinical Laboratory Science. Section I Hematology. 1980. V.III. P. 301.
11.     Меньшиков В.В. / Лабораторные методы исследования в клинике. --- М.: 1987. --- 310 с.
12.     Li Z., Agelon L.B., Vance D.E. / J.Biol. Chem. 2005. V.280(45). P.37798-37802.
13.    http:/www.diapharma.com/products/hemostasis/chromogenic_substrates/activated_protein_c_apc/s821090_821090
14.    http:/www.diapharma.com/products/hemostasis/chromogenic_substrates/thrombin/s820324_820324